胰岛素的注射部位多数在腹部、手臂、大腿、臀部等部位，将针头以45°-90°角，快速的刺入注射部位。
胰岛素的注射部位，多选择皮下脂肪多、皮肤松软的部位，如腹部、手臂前外侧、大腿前外侧、臀部外上1/4的部位，因为这些部位的下面，都有一层可以吸收胰岛素的皮下脂肪组织，而且没有较多的神经分布，注射时不舒服的感觉相对较少。不同注射部位胰岛素的吸收是不同的，腹部是最快，其次是手臂，最慢的是大腿和臀部。选择好注射部位时，用酒精棉球消毒注射部位。注射时轻轻捏起注射部位2-3cm的皮肤，另一手握住注射器，将针头以45°-90°角快速的刺入注射部位，推动注射器，然后放松提起的皮肤。瘦弱者、儿童以45°角进针，体胖者以90°角注射。患者注射胰岛素时，应注意更换注射部位，间隔两次的注射不应该小于1公分，同一部位注射间隔应该一个月。
注射胰岛素的针头需要每次更换，注射胰岛素之后，也要把用过的针头从胰岛素的笔上取下并且丢弃，胰岛素的针头不能二次使用。